فهرست مطالب
میز 1حذف Triton X-100 و TnBP از محلول ایمونوگلو!
مواد شوینده: 0.5 مولار NaCl در پودر قطعه!
محتوای Triton X-100 زیر حد تشخیص بود که ستون!
برای کاهش خطر اتصال پروتئین غیر اختصاصی به رزین؟
خون 79 (1992) 826.[10] D«. Josic,ˇ F. Bal, H. Schwinn
میز 1حذف Triton X-100 و TnBP از محلول ایمونوگلو!
بولین های پودر قطعه شویی تیمار شده با S/D با استفاده از Amberlite XAD-7 – تعیین ظرفیت پروتئین های تحت درمان با S / D Triton X-100 TnBPایمونوگلوبولین هاحجم قیمت پودر نانو اعمال شده Applied Eluted Recovery Applied هگزا شیمی Eluted Recovery Applied Eluted Recovery(ml) (mg) (mg) (%) (mg) (mg) (%) (mg) (mg) (%)10 1360 1088 88 100 94.4 94.4 30 28 93.35 680 620 91 50 48.0 96.0 15 14.2 94.62.5 340 306 90 25 24.5 98.0 7.5 7.3 97.32 272 250 92 20 19.8 99.0 6.0 5.9 98.3. شکل 1 پودر قطعه شویی را نشان می دهد.
ایمونوگلوبولین پودر قطعه شویی های 2.0، 2.5، 5.0 و 10.0 میلیلیتری S/D پس از رقیقسازی بهطور جداگانه روی ستونها (5_1.6 سانتیمتر، 10 میلیلیتر حجم بستر) اعمال و شسته شدند (به بخش تجربی مراجعه کنید).90 A. Trescecˇˇ et al. / J. کروماتوگر. A 852 (1999) 87 -91شکل 1. حذف قیمت پودر نانو معرف های S/D از ایمونوگلوبولین های تیمار شده (7 میلی لیتر) با استفاده از Amberlite XAD-7 در یک آزمایش تحلیلی. شرایط کروماتوگرافی: ستون 20_1.6 سانتی متر (تقریباً 40 میلی لیتر حجم بستر)، سرعت جریان 28 میلی لیتر سانتی متر _2 ساعت _1، کسر 7 میلی لیتر.
مواد شوینده: 0.5 مولار NaCl در پودر قطعه شویی !
بافر فسفات 0.01 مولار (E1)، 1.0 مولار NaCl در بافر فسفات 0.01 مولار (E2) و 96٪ (w/v) اتانول (E3). فراکسیون ها ادغام شدند و از نظر پروتئین، TnBP و Triton X-100 بررسی شدند. پیک اول حاوی ایمونوگلوبولین بود در حالی که معرف های S/D با شوینده E3 در دو پیک قیمت پودر نانو دیگر شسته شدند.جذب بر روی رزین Amberlite XAD-7)، با استفاده از کاست های غشایی Minissete با اولترافیل hexachem تریته شد. گلایسین به ایمونوگلوبولین های دیافیلتر شده اضافه شد، pH تنظیم شد و در نهایت ایمونوگلوبولین ها از طریق غشای 0.22-mm فیلتر شدند.
برای ایمونوگلوب پودر قطعه شویی ولین های تهیه شده به این روش، باقیمانده TnBP و Triton X-100، پروتئین ها و محتوای آنتی بادی تعیین و با شروع S/D غیرغیرطبیعی مقایسه شد.جدول 2تولید ایمونوگلوبولین ها از جمله درمان S/Dایمونوگلوبولین های درمان شده این نتایج در جدول 2 نشان قیمت پودر نانو داده شده است. در طول این فرآیند تولید توصیف شده، حدود 35 درصد از پروتئین های شروع کننده از بین رفتند. جدای از آن، از دست دادن ایمونوگلوبولینهای کلاسهای مختلف یا هگزا شیمی آنتیبادیهای خاص مشاهده نشد، اما مقدار کمی بالاتر از پلیمرها مشاهده شد (جدول 2).
محتوای Triton X-100 زیر حد تشخیص بود که ستون!
نمونه ها پروتئین پودر قطعه شویی ها کلاس های ایمونوگلوبولین ها (%) پلیمرها محتوای آنتی بادی (IU g _1 پروتئین) Triton X-100 TnBP(g) (%) (_g ml _1) (_g ml _1)IgG IgA IgM ضد کزاز ضد هپاتیت Aشروع ایمونوگلوبولین ها272_16 98.3_1 1.6_0.3 _0.1 2.1_0.2 485.7_22 785.7_30 10 000 3000ایمونوگلوبولین های تحت درمان با S/D1 178.9 98.0 1.9 _0.1 2.95 462.0 693.0 _1 0.42 18 قیمت پودر نانو 4.1 97.5 2.4 _0.1 2.88 426.7 812.0 _1 1.63 171.9 98.7 1.2 _0.1 3.63 481.6 688.8 _1 0.1سه آزمایش جداگانه انجام شد (به آزمایش مراجعه کنید) و محصولات نهایی با محلول اولیه ایمونوگلوبولین مقایسه شدند. شکل 2 قیمت پودر نانو را نشان می دهد.
Trescecˇˇ و پودر قطعه شویی همکاران. / J. کروماتوگر. A 852 (1999) 87 -91 91سوئیچینگ HPLC استفاده شد. محتوای TnBP کمتر از 2 گرم در میلی لیتر بود (جدول 2). این مقادیر، به ویژه برای Triton X-100، کمتر از داده های ادبی به دست آمده با روش های کلاسیک موجود بود [8،9،11].کاربرد Amberlite XAD- قیمت پودر نانو 7 به عنوان جاذب برای حذف S/D احتمالاً بر اساس یک جذب حالت مخلوط مرتبط با اثر حذف مولکولی است. برهمکنش بین Amberlite XAD-7 و S/D ظاهرا قوی تر از برهمکنش بین ایمونوگلوبولین ها و S/D است، به همین دلیل است که S/D را می توان از ایمونوگلوبولین ها جدا کرد.
برای کاهش خطر اتصال پروتئین غیر اختصاصی به رزین؟
Amberlite XAD-7، بافر پودر قطعه شویی اعمال شده حاوی 0.5 مولار NaCl بود. آزمایشهای مشابه حذف S/D از سیالات بیولوژیکی با استفاده از پلیمرهای اکریلیک آبگریز با پیوند متقابل سه بعدی (SDR-HyperD) توسط Guerrier و همکاران توصیف شد. [11]. در مقایسه با نتایج ما، ظرفیت جذب قیمت پودر نانو جاذب SDR-HyperD برای TnBP بیشتر از رزین Amberlite XAD-7 است، اما برای Triton X-100 وضعیت برعکس است. سایر روش های مشابه برای حذف معرف های S/D از سیالات بیولوژیکی بر اساس کروماتوگرافی مایع فاز معکوس است.
هوروویتز و پودر قطعه شویی همکاران [9] نشان داده اند که معرف های S/D پس از استخراج قبلی با روغن سویا، به طور موثری از پلاسمای انسانی تیمار شده توسط رزین C 18 Prep حذف شدند. قیمت پودر نانو یک میلی لیتر از رزین C 18 Prep به طور موثر Triton X-100 و TnBP را از 6 میلی لیتر پلاسمای تیمار شده حذف کرد [9]. بدیهی است که ظرفیت رزین C 18 Prep بیشتر از Amberlite XAD-7 است، اما محتویات باقیمانده همانطور که جدول 2 نشان می دهد، وقتی از Amberlite XAD-7 استفاده شد، TnBP و Triton X-100 کمتر هستند [9].
خون 79 (1992) 826.[10] D«. Josic,ˇ F. Bal, H. Schwinn
, J. Chromatogr. 632 (1993) 1.[11] L. Guerrier, I. Flayeux, E. Boschetti, M. Burnouf-Radosevich, J. Chromatogr. B 664 (1995) 119.[12] F. Gao، A.M. hexachem پرنس ، دی. پاسکوال، بی. هوروویتز، وکس سانگ. 64 (1993) 204.[13] I. Andersson، L.O. لیندکوئیست، ال. برگلوف، ارائه شده.
در کنگره بیست و سوم ISBT، آمستردام، 1994[14] ؟
- Nagaki، R.D. Hughes، J.Y. لاو، آر. ویلیامز، بین المللی.
جی آرتیف. اندام ها 14 (1) (1991) 43.[15] M. Nagaki، R.D. ؟
Hughes، H.M. کین، جی. Lau، R. Williams، Circ. شوک 38.
(3) (1992) 182.[16] R.D. ؟
Hughes, R. Williams, Int. جی آرتیف. Organs 4 (1981) 224.
بدون دیدگاه